ثالثا : أختبار أحمر الميثيل و أختبار فوكس بروسكاور
Methyl Red / Voges-Proskauer (MR/VP)
( M - Vi )
BBL™ MR-VP Broth
Pancreatic Digest of Casein ................................... ..... 3.5 g
Peptic Digest of Animal Tissue ................................... 3.5 g
Potassium Phosphate ................................... .............. 5.0 g
Dextrose ................................... .................................. 5.0 g
Difco™ MR-VP Medium
Buffered Peptone ................................... .................... 7.0 g
Dipotassium Phosphate ................................... ........... 5.0 g
Dextrose ................................... .................................. 5.0 g
وهما يجريان لأختبار أختبار سلوك البكتريا المعزولة في تمثيل الكربو هيدرات مثل الجلوكوز أو الدكستروز والتى تتميز الى مجموعتين الاولي تنتج كمية كبيرة ومختلطة ناتجة عن التخمر mixed acid fermentation من حامض الاكتيكlactic و الاستيك aceticوالسكسنيك succinic والفورميكformic و غاز مثل H , Co2 والكحول ، وهذة الكمية من الاحماض تتغلب علي المحلول البفر وتوصل الph الي 4.4 وبوضع أحمر الميثيل كدليل لوني تتلون العينة بالون الأحمر كنتيجة موجبة ،أ ما لوكان ال ph قريب للتعادل ولم يصل لهذا الحد فالون الاصفر دليل علي سلبية الاختبار ويعني ذلك ايضا نة لم يتجاوز قيمة ال 6 ph .
و الثانية تنتج أحماض بكميات طفيفة جدا ولكنها تصل بالميتابولزم النهائي الي 2,3
butanediol و acetone و بوضع كمية محسوبة من الدليلين alpha-napthol الموجود في Barritts reagent a و potassium hydroxide الموجود في Barritts reagent b والخلط الجيد لمساعدة الاكسجين في التخلل يظهر اللون الاحمر في البيئة كنتيجة موجبة أما إذا كانت النتيجة سالبة فاللون يكون الون brownish-green to yellow وقد يستغرق هذا الاختبار ساعة كحد أعلى.
1- inoculate tubes of MR-VP media or broth with an a loop full pure cultures to 18- to 24-hour aerobically at 35 ± 2°C for a minimum of 48 hours .
2- Prepare the methyl red indicator by dissolving 0.1 g of methyl red in 300 mL of 95% ethyl alcohol. Add sufficient purified water to make 500 mL. After the appropriate incubation period, aseptically remove aliquots (1 mL for the VP test) of the medium and conduct the following tests:
1. Methyl Red Test – Add 5 drops of methyl red indicator to an aliquot of the broth. Interpret the color result immediately.
2. Voges-Proskauer Test – Empty the contents (15 drops) from the reagent A dropper and 5 drops from the reagent B dropper into 1 mL of broth culture. Shake well after the addition of each reagent to aerate the sample.
Escherichia coli ………………….. (MR positive) (VP negative)
Klebsiella pneumoniae .................(MR negative) ( VP positive )
Enterbacter aerogenes…………... (MR negative) ( VP positive )
اقتباس
المشاركة الأصلية كتبت بواسطة م- عمرو نجيب
