نقاش في ميكروبيولوجي

[م- عمرو نجيب]

طبعا وجدت هذا الموضوع مهم جدا وطويل والاهتمام بة محدود بالرغم من خطورتة لذا سوف أحاول أن أكمله علي فترات متقاربة

قد يبدوا الموضوع أكاديميا من النظرة الاولي لكنة مهم جدا خاصة في المصانع التي تتبع نظم جودة عالمية وتحافظ علي درجة عالية من الهيجين حيث أن الموضوع بشكل كبير خاص بالاخوة بمختبر الميكرو بيولوجي

تنوية: الموضوع يحتاج معرفة مسبقة جيدة بأساسيات الميكرو بيلوجيا العملية

و به جوانب عديدة لذا فقد فضلت الايجاز والتبسيط بهذا الشكل وللتوسع المصادر التالية متوافرة علي الشبكة وأنصح بالاطلاع عليها

المصادر العلمية والمهنية للموضوع

AOAC Official Method 966.24

SECOND EDITIONHANDBOOK OF WATER ANALYSIS

MANUALMANUAL OF MICROBIOLOGICAL CULTURE MEDIA DIFCO & BBL

Practical Food Microbiology

BERGEY’S MANUAL OF Systematic Bacteriology Second Edition

Iso 4831/1991 and Iso 7251/2005

الشريك، ي.م - تقنية اللحوم – منشورات جامع الفاتح – طرابلس
المنلا ، ع الرقابة الصحية للحوم والأسماك ومنتجاتـها – منشورات جامعة البعث- كلية الطب البيطري – العراق

ملحوظة هامة جدا للكشف عن الكولي فورم بشكل عام بغرض تكنولوجي يتم التحضين على درجة 30 co

أما أذا كان للصحة العامة فيجب التحضين على 37 co أما الأشريشيا كولاي فتكون درجة التحضين 44 co وفي بعض المراجع 44.5 co: 45.5co

أي بيئة لابد أن يتوافر بـها مصدر للنتروجين والاحماض الامينية الاساسية والفيتامينات والاملاح المعدنية ومصدر للكربون والطاقة وقد تضاف مواد لضبط الضغط الاسموزي و أخري تعمل كبفر وفي حالة البيأت المتخصصة قد تضاف مادة لمنع نمو مجموعة دون الاخري وقد تضاف أيضا مواد للتفرقة بين ميتابوليزم عدة أجناس

أولا : ملخص لبعض المديات المستخدمة في الكشف عن الكوليفورم البرازية والايكولاي

والتى يعتبر وجودها مؤشر للتلوث البرازي وأنخفاض الهيجين بالمنتج وخلل خطير بنظام الجودة

بيئة مرق ماكونكي MACCONKEY BROTH

تستخدم عادة في إجراء للأختبار الأحتمالي presumptive test لمجموعة الكولي فورم fecal coliform ، والتي تتميز بأنـها عصوية bacilli ،سالبة لصبغة جرام gramnegative،مـخمرة لسكر الاكتوزlactosefermenting كمصدر وحيد للطاقة .

Difco™MacConkey Broth

Oxgall ................................... ................................... ... 5.0 g

Peptone ................................... ................................ 20.0 g

Lactose ................................... ................................. 10.0 g

Bromcresol Purple ................................... ................. 0.01 g

وتقدم هذة البيئة الببتون Peptone كمصدر أساسي للنيتروجين وللأحماض الامينية amino acids والمواد الاساسية للنمو كالفيتامينات والاملاح المعدنية ، والاكتوز Lactose كمصدر وحيدالكربون و الطاقة ، مما يسمح بنمو العصويات السالبة لجرام دون غيرها ،ويعزز ذلك إضافة Oxgall صفراء الثوركمادة مثبطةinhibits لنمو البكتريا الموجبة لجرام ويضاف الBromcresol Purple كدليل لوني للبيئة بتغير ال ph وأنتاج الأحماض من اللون الوردي الزاهي الي اللون الاصفر الباهت ،ومع وجود أنبوبة درهام مما يظهر بوضوح عملية أنتاج الغاز.

مواضيع مشابهة:

• [نقاش] عيوب الجبن البيضاء
• كتب في ميكروبيولوجي الألبان
• نقاش: عمل مشروع زراعي خاص

[م- عمرو نجيب]

مرق الاكتوز Lactose Broth

وهي بيئة غير متخصصة تستخدم في الغالب في مرحلة pre-enrichment و تعطي الفرصة الكاملة لنمو السالمونيلا salmonellae و البكتريا المخمرة للاكتوز بشكل عام لذ سوف نتوقف بـها عند هذا الحد.

Difco™Lactose Broth

Beef Extract ................................... ............................ 3.0 g

Peptone ................................... .................................. 5.0 g

Lactose ................................... ................................... 5.0 g

مرق لوريال سلفات التربتوز (LST) Lauryl Tryptose Broth

تستخدم هذة البيئة بشكل كبير في إجراء للأختبار الأحتمالي presumptivetest لبكتريا القولون والايكولاي بطريقة (mpn) عند درجات حرارة تتراوح من 30co: 37 co حسب الغرض المطلوب من الاختبار .

Difco™Lauryl Tryptose Broth

Tryptose ................................... . ...................... ......20.0 g

Lactose ................................... . ............................... 5.0 g

Dipotassium Phosphate ........... .............................. 2.75 g

Monopotassium Phosphate .... ............................... 2.75 g

Sodium Chloride ............................................. . ...... 5.0 g

Sodium Lauryl Sulfate ................................... ............. 0.1 g

حيث يمد التربتوز البيئة بالمواد الأساسية للنمو كالنيتروجين و الفيتامينات و..... ، و الاكتوز يعتبر مصدر الكربون والطاقة الوحيد القابل للتخمر وفوسفات البوتاسيوم كبفر، وكلوريد الصوديوم كضابط للضغط الاسموزي ،واللوريال سلفات تضاف كمادة مانعة لنمو أي نوع بكتيري خلاف الكولي فورم،ويعتبر أي تغير في درجة الشفافية أو وجود عكارة أو ظهور غاز في أنابيب درهام نتيجة موجبة للأختبار.

مرق الاكتوز والصفراء مع الأخضر الامع2% Brilliant Green Bile Broth 2%

تستخدم هذة البيئة كأختبار تأكيدي في طريقة ال(mpn) للكشف عن الكولي فورم وتحتوي البيئة على Oxgallو ال Brilliant Greenكمادتين مثبطتين لنمو البكتريا الموجبة لجرام

Difco™Brilliant Green Bile Broth 2%

Peptone ................................... ................................ 10.0 g

Oxgall ................................... ................................... . 20.0 g

Lactose ................................... ................................. 10.0 g

Brilliant Green ................................... ..................... 13.3 mg

وتتميز البيئة باللون الاخضر ويعتبرأي تغير في الشفافية أو وجود عكارة أو غاز في أنابيب درهام نتيجة موجبة للأختبار

مرق بيئة الإيكولاي EC Medium

Difco™EC Medium

Tryptose ................................... ................................ 20.0 g

Lactose ................................... ................................... . 5.0 g

Bile Salts No. 3 ................................... ........................ 1.5 g

Dipotassium Phosphate ................................... ........... 4.0 g

Monopotassium Phosphate ....................... ................. 1.5 g

Sodium Chloride ....................... ................ ................. 5.0 g

طبعا نفس الكلام السابق مع وجود Bile Salts لمنع نمو البكتريا موجبة لصبغة جرام لكن الفرق أنه يتم التحضين علي 44.5 ويكون لون البيئة أصفر شفاف ووجود عكارة أو غاز في أنابيب درهام نتيجة موجبة للأختبار

Difco™EC Medium with MUG

Tryptose ................................... ................................ 20.0 g

Lactose ................................... ................................... . 5.0 g

Bile Salts No. 3 ................................... ........................ 1.5 g

Dipotassium Phosphate ................................... ........... 4.0 g

Monopotassium Phosphate ................................... ..... 1.5 g

Sodium Chloride ................................... .............. ....... 5.0 g

MUG (4-methylumbelliferyl-â-D-glucuronide) .......... 0.05 g

كما نلاحظ الفرق الوحيد هو أضافة MUG (4-methylumbelliferyl-â-D-glucuronide)حيث أن الايكولاي تنتج أنزيم glucuronidase والذي يقوم بعملية hydrolyzes لل MUGلناتج فلورسنتي يظهر بوضوح تحت long-wave (366 nm) UV lightوأختيار البيأت يرجع للــطريقة المستعملة وإمكانيات المختبر

طبعا هناك العديد من البيأت الأخري لكن سنكتفي بـهذا القدر

بعض المعلومات الاساسية العامة عن

Family : enterobacteriaceae

1- عصويات –سالبة لصبغة جرام – غير مكونة للجراثيم

2- غير متجانسة التخمر – تخمر الاكتوز تكون أحماض ومجموعة من المركبات الكربونية المتعادلة – تنتج غاز

Co2,H

3- لا هوائية أختيارية

بعض الملاحظات التكنولوجية عن E.COLI

1- قد تسبب بعض النزلات المعوية لدي الاطفال

2- سريعة في تخمير الاكتوز مما قد يسبب طفو الخثرة في الجبن أو قد تسبب الانتفاخ المبكر في الجبن الجودا والايدام وفي حالة الاصابة الشديدة تكسب الخثرة قوام أسفنجي الحدود الحرارية لها من 5: 47 والمثلي 37 والبسترة قد تقضي عليها تما ما إلا ان هناك بعض الانوا المقاومة للحرارة

3- يسبب ورائح غير نظيفة وعادة تشبة رائحة البراز بسبب أنتاج مركبات الاندول ومركبات أخري عديدة

4- تحلل البروتين لكن بشكل ضعيف

5- يفرق بينها وبين الانتيرو باكتر بواسطة أختبار إيخمان حيث ينتج غاز من تخمر الاكتوز عند 44.5

التالي1- بعض الاختبارات الكيمو حيوية المستخدمة في التـفريق والتصنيف

G-IMVIC

2- خطوات أجراء طريقة (mpn) العدد الاكثر احتمال

يتبع إن شاء الله

[م- عمرو نجيب]

المخططات السابقة للأطلاع ومعرفة فائدة الاختبارات الكيمو حيوية في التصنيف تمهيدا للموضوع التالي

[م- عمرو نجيب]

http://uqu.edu.sa/hhabulreesh/ar/20092
http://inst.bact.wisc.edu/inst/index...cle&art_id=269
الرابط التالي من أرورع المواقع علي الاطلاق في مجال تعريف وتصنيف البكتريا
أرجو وضع روابط مشابهة
http://www.tgw1916.net/bacteria_abis.html

[nuhad]

مجهود رائع... سنحاول قدر الأمكان التواصل معك مع صعوبة ذلك لأن تخصصي في الكيمياء وليس البيولوجي... بارك الله فيك.

[م- عمرو نجيب]

والله ياريت يا بشمهندس نستفيد من خبرتك في مجال التحاليل الكميائية
وأن كنت أقترح موضوع لتحليل مياة الشرب والبلدية وخاصة أني سأبدا يوم الاحد القادم دورة بهذا الشأن

[جمال عبد العظيم]

اخي العزيز عمرو لقد فتحت النقاش في موضوع غاية في الاهمية وهوموضوع كبير ومتشعب ويحتاج الكثير من الوقت ولكن انشاء الله سحاول ان اشترك معك في ذلك الموضوع ومن الموضوعات التي اهتم بها موضوع التوكسينات والفطريات وانا بحضر فيهم وياريت دعوة لكل الاعضاء يالتجاوب في تلك المواضيع الحيوية

[amonaa]

ممتاز اخى عمرو واختيار موفق فالكثير والكثير يعلم انه هناك علم الميكروبيولوجى واهميته فى التصنيع الغذائى وكذلك اهميته فى تنفيذ خطط الهاسب مع الجزء الكيماوى والفيزيائى للمنتجات على طول خط التصنيع والحفاظ على الجودة ولكن لا يعلم كيفيه التعامل معه فى المعمل الا المتخصصين فقط >>>>>>>>>>>>احب ان اضيف الى مواقعك موقع للاستاذ حمادة عبد الستار معيد بقسم الصناعات تخصص الميكروبيولوجى ويوجد به الكورسات العمليه للميكروبيولوجى بالعربى والانجليزىوقد استفدت منها شخصيا مع الصور

http://fstalex.freehostia.com/COURSE...413sheets.html


http://www.tgw1916.net/bacteria_abis.html

بارك الله فيك اخى الكريم ..............وننتظر المزيد من موضوعاتك الشيقة والهامة

[م- عمرو نجيب]

جميل والله أتمنى حسن التفاعل وموقع جميل جدا أختي جزاك الله خير
وبالنسية للسموم والفطريات و أنا معك يا هندسة من أول أخذ العينات والاستخلا ص حتي التقدير
وأتمنى فتح هذا الموضوع الرائع

[جمال عبد العظيم]

علي فكرة اخي عمرو انا نازل اجازة الي مصر قريبا اتمني ان نتقابل انشاء الله ارجو ترك تليفونك علي ايميل
gamalh2020[at]hotmail.com

[م- عمرو نجيب]

2- أستخدام التفاعلات الكيمو حيوية للتعرف علي وتصنيف البكتريا

G-IMVIC

أولا : أختبار تكوين الاندول

هو قياس قدرة البكتريا المعزولة تكوين الأندول indol من تكسيرالحمض الأميني التربتوفان tryptophan بواسطة أنزيم tryptophanase منتجة حامض البيروفك و الامونيا والاندول كنواتج التمثيل ويكشف عنة بواسطة Kovac’s reagent .

طريقة الاجراء

Inoculate the tryptophan (or peptone) broth with the test organism (loop full) and incubate at 37°C for 24-28 hours
Add 0.5 mL of the Kovac’s reagent and gently agitate
Examine the upper layer of liquid

Positive result red colour (occurring within a few seconds)

Negative result yellow colour

Escherichia coli (indole positive)

Klebsiella oxytoca (indole positive)

Klebsiella or Enterobacter bacteria (indole negative)

هذا الاختبار يجري للتأكد من الأشريشيا كولاي في نهاية طريقة العدد الاكثر أحتمال

ملحوظة هامة بعض أجناس الايكولاي لا تعطي نتيجة موجبة لذا لابد من أجراء باقي الاختبارات معمليا أو عموما هي متوافرة في شريحة API 20Eوالتي سوف أفصل فيها فيما بعد

[amonaa]

ممتاز اتمنى فعلا الاستجابة للدعوة للمناقشة وفتح حوار ومصادر علمية تفيد الجميع وانا امتلك عده كتب تخص الميكروبيولوجى سوف احاول ادراجها بالموضوع لتعم الفائدة للجميع واتمنى التنبيه فى الجزء الخاص بميكروبيولوجى الهاسب والجودة ............والجزء الاخر فى اهميه الكائنات الميكروبية فى تصنيع الاغذية ...........ليتضح لنا ان الكائنات الدقيقه سلاح ذو حدين احدهما مفيد والاخر ضار ..............بارك الله فيكم

[مصطفى وهبه]

الاخ العزيز عمروو كم انا سعيد لانك اخترت هذا الموضوع
بعد ان كان لك راى مخالف لذلك فى احد المشاركات وذكرت لك ما قمت به من بحث عندما اضفت سوربات
البوتاسيوم على بيئه الاجار اجار وقمت بزرع سلالات مختلفه من البكترياعلى هذه البيئه والنتائج التى توصلت اليها
حينذاك فأنت بالطبع تتذكر الرد
اشكرك واتمنى لك التوفيق

[م- عمرو نجيب]

لك خالص الشكر يابشمهندس ومازلت مصر علي وجهة نظري ولكن جميل أن نري الموضوع كل من زاويتة الخاصة وأختلاف الخبرات والاراء ينتجج عن تفاعلها فائدة كبيرة للكل وقد توجة النظر لموضوع أخر خارج نطاق الحديث لكن ذا أهمية شديدة وأرحب بك في مساندتنا أنا والاخوة في هذا الموضوع لأنة فعلا كبير ومحتاج تخصصات مختلفة وموضوع الكوليفورم خطير جدا بعد أكتشافي لمنتجات كثيرة في الاسواق تحتوي على حمل عالي منها لذا سميت الموضوع نقاش و أرحب بأي توجية منكم أو تعديل كما أرجو من الاخوة حسن التفاعل والمشاركة في الموضوع

[مصطفى وهبه]

يا اخى لك رايك وهو بالضروره لا يشترط ان يكون صحيح لان وجهات النظر قد يؤخذ بها فى المسائل الفلسفيه
اما فى الحقائق والابحاث العلميه فلا مجال لذلك لان الباحث يوجد مكانه فى المعمل وليس تحت شجره صفاف فى احد ليالى الصيف .
وليس معنى انى لبست بالطو ابيض ووقفت على خط انتاج اننى امتلكت تكنولوجيا التصنيع او نقلت موضوع من احد
كتب التصنيع لاحد الاساتذه الكبار بعد ان بسطه للطلبه او المهندسين حديثى التخرج اننى اكون قد امتلكت باب العلم
افتحه لمن شئت واغلقه على من شئت. المهم يا مهندس
المشكله ليست فى المتخصصين فى هذا المجال فلدينا فى مصر خبرات كبيره جدا وعلى قدر عالى
من العلم والابحاث المنشوره فى الدوريات العلميه كثيره باسماء علماء مصريين
المشكله فى المواصفه القياسيه المصريه فانها فضفاضه والذى تسمح به من عدد بكتيرى فى 1سم مكعب من الماده الغذائيه او محلولها كبير .
هذا العدديسمح بظهور بكتريا القولون ومن ثم البكتريا المرضيه.
وبالنظر الى المواصفه القياسيه السعوديه وهى حديثه بالنسبه لنا فى مصر فهى تقلل الى ابعد مدى العد البكتيرى فى 1سم مكعب من الماده الغذائيه او محلولها وللعلم الذين قاموا بعمل المواصفه القياسيه السعوديه
الخاصه بالمواد الغذائيه ومحتواها البكتيرى هم مجموعه من اساتذه الصناعات الغذائيه المصريين