المساعد الشخصي الرقمي

مشاهدة النسخة كاملة : طريقة فحص الكربوهيدرات



ابو هيثم
29-03-2011, 09:39 PM
السلام عليكم


احب ان اضع امامكم طريقة تحليل الكربوهيدرات للاستفاده منها مع العلم بانني غير مختص بهذا المجال.





فحص الكربوهيدرات
الهدف :ـ

ايجاد نسبة الكربوهيدرات المتكون من ( النشا والسكر ) في العلف ومن الكربوهيدرات نستطيع ايجاد الطاقة التمثيلية للعلف .

المواد الكيميائية :ـ

1- 80% ايثانول في دورق حجمي 250مل ( 80مل ايثانول + 20 مل ماء مقطر ) .
2- 52% Perchloric acid
_______52× 100
%70 Perchloric

74.3مل في دورق حجمي 100 مل
-3 محلول 0.1% انترون ( (Anthrone في 100 مل من ( 76% H 2S04 = 76مل H2S04 + 24 مل مقطر )
4- محلول جلوكوز قياسي ( 100ميكروجرام / مل )
يجفف الجلوكوز في الفرن ثم زن 0.1 جم من الجلوكوز واذابتها في 10مل ماء مقطر ثم يؤخذ منه 25ميكروليتر وتذاب في 250مل ماء مقطر .


الادوات :ـ
1- جهاز Spectrophotometer))
2- جهاز Centrifuge))
3- جهاز ( shaker)
4- ميزان حساس
5- انابيب خاصة لجهاز الطرد المركزي
6- حمام مائي على درجة حرارة C100
7- انابيب باغطية طولها 25سم
8- ورق ترشيح
9- اقماع


طريقة استخلاص السكر
1- وزن 0.2 جم – 0.3 جم من العينة في انبوب جهاز الطرد المركزي
2- اضافة 5 مل من الماء المقطر
3- اضافة 25مل من 80% ايثانول ساخن
4- رجة على الرجاج لمدة 10دقائق
5- وضعة في جهاز الطرد المركزي لمده نصف ساعة
6- اخذ الرائق ووضعة في كاس سعة 100مل
7- اضافة 30مل من الايثانول الساخن على الراسب ثم رجها لمدة 10 دقائق وبعدها توضع في جهاز الطرد المركزي لمده نصف ساعة
8- تأخذ الرائق ونضعه في الكاس السابق (6) ثم اخذ الراسب لتحضير طريقة النشا .
9- وضع الكاس المحتوي على السائل على حرارة هادئة حتى اختفاء رائحة الايثانول ويبقى تقريبا 10% من السائل
10- تكمله الحجم الى 100مل بالماء المقطر باستخدام دورق حجمي سعته 100 مل وترشيح العينة باستخدام قمع وورق الترشيح

# لملاحظة تطور اللون الناتج وذلك من خلال اخذ انابيب الاختبار ووضع فيها
1- 1مل من سائل السكر + 1 مل من ماء مقطر + 10مل انترون
2- 2 مل من سائل السكر + 10مل انترون
3- (بلانك ) 2 مل ماء مقطر + 10مل انترون

غلي الانابيب لمده 12 دقيقة في حمام مائي درجة حرارته 100درجة مئوية تبريدها ثم قراءتها على جهاز Spectrophotometer)) على طول موجه 630 وتسمى القراءه 0.D


طريقة النشا :ـ

1- اخذ الراسب الذي نتج من طريقة السكر واضافة عليه
5 مل من الماء المقطر
6.5 مل من Perchloric acid
2- رج العينة لمدة عشر دقائق ثم اضافة 20مل ماء مقطر
3- وضع العينة في جهاز الطرد المركزي لمدة نصف ساعة
4- اخذ السائل الرائق ووضعه في بيكر سعته 100مل
5- اعادة نفس الطريقة على الماده المترسبة
6- ووضع السائل الرائق في نفس البيكر السابق
7- تكملة الحجم الى 100مل بالماء المقطر وذلك باستخدام دورق حجمي سعته 100مل
8- ترشيح باستخدام القمع وورق الترشيح
9- اخذ 1 مل من السائل المرشح ووضعه في دورق حجمي سعته 25مل وتكمله الحجم بالماء المقطر حتى العلامة .

ولملاحظة تطور اللون الناتج وذلك من خلال اخذ

1- 1مل من سائل النشا + 10مل انترون + 1 مل ماء مقطر
2- 2مل من سائل النشا + 10 مل انترون