amonaa
04-07-2007, 06:25 PM
انتاج نباتات موز معدلة وراثيا مقاومة للفيروسات
http://www.egypt-bic.com/photo/Royah8/banana.jpg
يعتبر الموز من أهم المحاصيل فى الدول النامية الاستوائية وشبه الاستوائية، وتعد مصر الدولة الرابعة فى إنتاج الموز حيث تقدر المساحة المنزرعة بحوالى 49,294 فدان، وتعطى انتاجا يقدر بحوالى 849,293 طن. ومن الملاحظ أن إصابة المحصول بالفيروسات يؤدى الى انخفاض كبير فى إنتاجية الفدان نظرا لقدرة الفيروسات على الانتشار السريع بواسطة الحشرات خاصة فيروس تورد القمة في الموز (BBTV). ومقاومة تلك الفيروسات سواء كان باستخدام المبيدات لمقاومة الناقل الحشرى أو استخدام تقنية زراعة الأنسجة لإنتاج نباتات خالية من الفيروس لم تؤدى الى تحقيق النتائج المرجوة، لذلك أصبح إنتاج نباتات موز معدلة وراثيا مقاومة لتلك الفيروسات هو الحل الأمثل لمقاومتها وزيادة إنتاج الموز .
وقد قامت كلية الزراعة بجامعة الاسكندرية بالتعاون مع معهد بحوث الهندسة الوراثية الزراعية (AGERI) بإنتاج نباتات موز معدلة وراثيا مقاومة لبعض الفيروسات وفيما يلي موجز عن المشروع البحثى وما تم انجازه فى هذا الشأن .
http://www.egypt-bic.com/photo/Royah8/banana1.jpg
أهداف البحث :
إنتاج نباتات موز معدلة وراثيا تحتوى على جين الغلاف البروتينى لكل من الفيروسات التالية:
·فيروس الـBBTV والذي يسبب مرض تورد القمة في الموز (BBTD).
·فيروس الموزيك في الموز(Banana–CMV) والذى يسبب مرض الموزيك فى الموز (BMD)
ويتم ذلك باستخدام تقنيات زراعة الأنسجة والهندسة الوراثية باتباع الخطوات التالية :
جمع العينات والتأكد من الفيروسات
تم جمع عينات من نباتات موز بها أعراض الاصابة بأمراض تورد القمة والموزيك، ثم التأكد من وجود تلك الفيروسات باستخدام سيرم مضاد متخصص لهما باستخدام تقنية إليزاELISA .
عزل الجينات وتجهيز المتراكبات الوراثيةGene Constructs
<LI dir=rtl>
تم عزل جينات الغلاف البروتينى لكلا الفيروسين (BBTV & Banana-CMV) وذلك باستخدام إحدى تقنيات البيولوجيا الجزيئية وهى PCR و RT-PCR.
<LI dir=rtl>
تم كلونة الجينات موضع الدراسة على حده في إحدى البلازميدات-وإدخالها في بكتريا القولون المعروفة باسم E. coli، ثم عزل الحمض النووى للبلازميدات ودراسة التتابع النيوكليوتيدى لتلك الجينات.
بعد التأكد من التعبير الجينى فى البكتريا، تم عمل كلونة باستخدام ناقل التعبير النباتى حتى تكون الجينات قادرة على التعبير عن نفسها داخل خلايا نباتات الموز .
تأسيس نظام التحول الوراثى
http://www.egypt-bic.com/photo/Royah8/banana2.jpg
تم تأسيس نظام التحول الوراثى لصنف الموز وليامز باستخدام تقنية الدفع الجينى عن طريق استخدام
جينات الـgus و bar .
إدخال الجينات وأقلمتها تحت ظروف الصوب
تم إدخال جينات الغلاف البروتينى لكلا الفيروسين بصورة منفصلة فى صنف الموز وليامز واستكمال خطوات إعادة التمايز للحصول على نباتات كاملة ثم أقلمتها تحت ظروف الصوب.
الكشف عن الجينات فى نباتات الموز المعدلة وراثيا
تم الكشف عن وجود وتعبير الجينات موضع الدراسة باستخدام تقنيات الـ PCR و ELISA وWestern blot .
تقييم النباتات المعدلة وراثيا تحت الظروف الحقلية
بعد التأكد من نجاح التعبير الجينى لجين الغلاف البروتينى لكلا الفيروسين داخل خلايا نباتات الموز المعدلة وراثيا، يتم حاليا تقييم قدرة تلك النباتات على مقاومة الفيروسات –موضع الدراسة- فى حقل منعزلContained field trail وفى وجود نباتات غير معدلة وراثيا ومصابة بهذه الفيروسات (كمصدر للاصابة الفيروسية) بجانب عدم استخدام أى مبيدات لمقاومة الحشرات الناقلة لتلك الفيروسات.
http://www.egypt-bic.com/photo/Royah8/banana.jpg
يعتبر الموز من أهم المحاصيل فى الدول النامية الاستوائية وشبه الاستوائية، وتعد مصر الدولة الرابعة فى إنتاج الموز حيث تقدر المساحة المنزرعة بحوالى 49,294 فدان، وتعطى انتاجا يقدر بحوالى 849,293 طن. ومن الملاحظ أن إصابة المحصول بالفيروسات يؤدى الى انخفاض كبير فى إنتاجية الفدان نظرا لقدرة الفيروسات على الانتشار السريع بواسطة الحشرات خاصة فيروس تورد القمة في الموز (BBTV). ومقاومة تلك الفيروسات سواء كان باستخدام المبيدات لمقاومة الناقل الحشرى أو استخدام تقنية زراعة الأنسجة لإنتاج نباتات خالية من الفيروس لم تؤدى الى تحقيق النتائج المرجوة، لذلك أصبح إنتاج نباتات موز معدلة وراثيا مقاومة لتلك الفيروسات هو الحل الأمثل لمقاومتها وزيادة إنتاج الموز .
وقد قامت كلية الزراعة بجامعة الاسكندرية بالتعاون مع معهد بحوث الهندسة الوراثية الزراعية (AGERI) بإنتاج نباتات موز معدلة وراثيا مقاومة لبعض الفيروسات وفيما يلي موجز عن المشروع البحثى وما تم انجازه فى هذا الشأن .
http://www.egypt-bic.com/photo/Royah8/banana1.jpg
أهداف البحث :
إنتاج نباتات موز معدلة وراثيا تحتوى على جين الغلاف البروتينى لكل من الفيروسات التالية:
·فيروس الـBBTV والذي يسبب مرض تورد القمة في الموز (BBTD).
·فيروس الموزيك في الموز(Banana–CMV) والذى يسبب مرض الموزيك فى الموز (BMD)
ويتم ذلك باستخدام تقنيات زراعة الأنسجة والهندسة الوراثية باتباع الخطوات التالية :
جمع العينات والتأكد من الفيروسات
تم جمع عينات من نباتات موز بها أعراض الاصابة بأمراض تورد القمة والموزيك، ثم التأكد من وجود تلك الفيروسات باستخدام سيرم مضاد متخصص لهما باستخدام تقنية إليزاELISA .
عزل الجينات وتجهيز المتراكبات الوراثيةGene Constructs
<LI dir=rtl>
تم عزل جينات الغلاف البروتينى لكلا الفيروسين (BBTV & Banana-CMV) وذلك باستخدام إحدى تقنيات البيولوجيا الجزيئية وهى PCR و RT-PCR.
<LI dir=rtl>
تم كلونة الجينات موضع الدراسة على حده في إحدى البلازميدات-وإدخالها في بكتريا القولون المعروفة باسم E. coli، ثم عزل الحمض النووى للبلازميدات ودراسة التتابع النيوكليوتيدى لتلك الجينات.
بعد التأكد من التعبير الجينى فى البكتريا، تم عمل كلونة باستخدام ناقل التعبير النباتى حتى تكون الجينات قادرة على التعبير عن نفسها داخل خلايا نباتات الموز .
تأسيس نظام التحول الوراثى
http://www.egypt-bic.com/photo/Royah8/banana2.jpg
تم تأسيس نظام التحول الوراثى لصنف الموز وليامز باستخدام تقنية الدفع الجينى عن طريق استخدام
جينات الـgus و bar .
إدخال الجينات وأقلمتها تحت ظروف الصوب
تم إدخال جينات الغلاف البروتينى لكلا الفيروسين بصورة منفصلة فى صنف الموز وليامز واستكمال خطوات إعادة التمايز للحصول على نباتات كاملة ثم أقلمتها تحت ظروف الصوب.
الكشف عن الجينات فى نباتات الموز المعدلة وراثيا
تم الكشف عن وجود وتعبير الجينات موضع الدراسة باستخدام تقنيات الـ PCR و ELISA وWestern blot .
تقييم النباتات المعدلة وراثيا تحت الظروف الحقلية
بعد التأكد من نجاح التعبير الجينى لجين الغلاف البروتينى لكلا الفيروسين داخل خلايا نباتات الموز المعدلة وراثيا، يتم حاليا تقييم قدرة تلك النباتات على مقاومة الفيروسات –موضع الدراسة- فى حقل منعزلContained field trail وفى وجود نباتات غير معدلة وراثيا ومصابة بهذه الفيروسات (كمصدر للاصابة الفيروسية) بجانب عدم استخدام أى مبيدات لمقاومة الحشرات الناقلة لتلك الفيروسات.