كيفية تحضير وسط بكتيريا المكورات العنقوديه

[الفاتح اسماعيل]

بسم الله الرحمن الرحيم



تحضير الاوساط الغذائيه (media)


اوساط بكتيريا المكونات العنقوديه staphylococcus aureus



baird parker


المكونات الاساسيه:
base medium 100ml


potassium tellurite sodium 1m
egg yolk emulsion 5m


الخطوه الاولى : تحضير الميديا الاساسيه base medium وتتكون من :
pancreattic digest of casein 10g
yeast extract 1g
meat extract 1g
sodium pyruvate 10g
l- glycein 12g
lithium chloride 5g
agar 12-22g
water 1000ml

طريقة التحضير :
تذوب المكونالت فى الماء وتسخن اذا لزم ويتم قياس الph حتى تصبح 7.2=02 فى درجة حراره 25م
poitassium tellurite emuleion


المكونات:
potassium tellurite (k2 te .3)1g
water 100ml

طرىقة التحضير:
- يذوب البوتاسيوم تلورايت فى الماء بتسخين قليل
- اذا ظهرت ماده غير ذائبه فى الماء يتم التخلص من البودره
- يعقم بالفلتر بلستخدام فلتر o.22m pore size
- يحفظ فى درجة حراره 4م لمدة شهر

egg yolk emulsion
استخدام بيض طازج
الخطوات :
1- اغسل البيض بفرشاه باستخدام مطهر مناسب
2- اغسل البيض بماء جارى
3- عقم البيض بغمسه فى كحول 70% لمدة 30ثانيه
4- اتركه ليجف فى الهواء اوبرشه بكحول يعقبه تعريضه للهب للتعقيم
5- فى جو معقم اكسر البيضه وافصل الصفار من البياض وذالك بنقله الى النصف واحد فى البيضه
6- ضع الصفار فى flask معقم
7- اضف 4 اضعاف الصفار ماء معقم ثم اخلط
8- سخن الخليط فى حمام مائى 47م لمدة ساعتين واتركه لمدة 18-24 ساعه 3م -2م
9- اجمع المحلول الطافى supertnatant فى flask للاستعمال
10- يحظ فى درجة حراره 3م - 2م لفترة اقصاها 72 ساعه
الخطوه الثانيه (للاغناء) brain heart :




المكونات :
enzymatic digest of animal tessue 10g
dehydrated calf brain infusion 12g
d
ehydrated beef heart infusion 5g
glu
cose 2g
so
dium chloride 5g
disodium hydrogen phosphate , anhydrous 2.5g
water
1000ml


طريقة التحضير :


- ذوب المكونات او الميديا الكامله فى الماء الساخن اذا لزم


- بعد التعقيم ال ph 7.4 -.2 فى درجة حراره 25م


- يوزع وسط التزريع فى الكميات 5مل -10مل فى انابيب


- عقم لمدة 15 دقيقه فى 121م .